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技术丨猪流行性腹泻的检测及其灭活疫苗的作

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猪流行性腹泻:

猪流行性腹泻,英文缩写为PED(PorcineEpidemicDiarrhea),由猪流行性腹泻病毒引起的一种接触性肠道传染病,其特征为呕吐、腹泻、脱水。

流行情况

猪流行性腹泻是导致仔猪腹泻死亡的主要原因之一,-年全国各地区呈爆发趋势且防治效果不明显。PED最明显特点是3~7日龄新生仔猪高发,临床表现为严重腹泻、呕吐、脱水,是致死率极高的肠道传染病。由于猪流行性腹泻病毒(Porcineepidemicdiarrheavirus,PEDV)为有囊膜不分节段单股正链RNA的结构特点,研究发现S基因存在核苷酸插入与缺失及氨基酸突变、ORF3基因存在氨基酸变异。部分地区PEDV流行株调查情况显示,国内大部分流行株亲缘关系较近,与疫苗株CV、中国早期分离株CH/S、韩国流行株DR13、泰国流行株TH/AY/2.7/12、日本株14JM/01等亲缘关系较远,这可能是导致疫苗免疫效果不佳、PED暴发流行的主要原因。

检测方法

仔猪感染PEDV在诊断过程中需要综合考虑各种因素。RT-PCR是目前普遍采用的一种分子生物学检测技术,具有快速、灵敏、特异等优点,但是通过复检各地区部分检测结果时,假阴、阳性的问题一直存在,在该流程中人为操作、主观判断、核酸污染等均可影响结果准确性。目前,胶体金试纸技术非常成熟,在应用过程中具有简便、快速、直观等优势,但与RT-PCR检测结果复核时也存在一定差别。PED临床症状和病理变化较为典型,在此基础上结合上述检测方法,可提高PED临床诊断准确性,实现及时预警,可有效防控PED流行与爆发,减少养殖企业经济损失。

变异株疫苗的使用情况

全国各地区PEDV流行毒株与参考毒株ORF3和S基因同源性与系统进化研究结果表明,S基因存在核苷酸缺失、变异及突变,毒株之间存在部分差异与中抗体检测结果可以相互验证,解释了应用参考株疫苗虽然产生了抗体,但达不到预期免疫保护效果,而免疫灭活液却效果显著这一问题。灭活疫苗有商品化的灭活疫苗,也有自家灭活疫苗,其中自家灭活疫苗与现地株具有高度同源性,解决了血清型不同和病原变异这一主要矛盾。当某些种类疫病暴发且无有效防治方法时,自家苗可作为一种紧急防治措施控制疫情。研究表明应用来源于场内小肠组织病料重量与无菌生理盐水(0℃预冷)1:10比例、0.4%甲醛灭活48h、UI/mL双抗制备的灭活液产前70d、35d后海穴注射4mL/头免疫妊娠母猪,可作为紧急防治措施有效防控PED疫情。

但值得注意的是,虽然临时使用自家苗起到了明显的防治效果,相对于返饲又具有较好的生物安全性,但是自家苗的病毒效价、注射剂量、免疫麻痹、含多种抗原导致的免疫应激、非目标病原以及杂质。对机体的负面影响是需要慎重考虑的。建议在疫病防控中通过基因型比对等方法及时配型,使用标准化商用疫苗实现疫情的有效防控。如哈药集团生物疫苗有限公司生产的猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻二联灭活疫苗,在我国大多数地区均有销售,并取得了良好的免疫效果。

文章来源:哈药疫苗研发中心张智明提供



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